Piattaforma EV a spettro completo. Bioproduzione di precisione dalla fonte alla specifica.
BioThera Solutions gestisce una piattaforma completa (full-stack) di bioproduzione di vescicole extracellulari (EV, esosomi), dall'isolamento a monte fino alla caratterizzazione a valle in linea con MISEV2023, progettata per la coerenza, la tracciabilità e la produzione su larga scala. La nostra fonte attuale è di origine vegetale e la piattaforma è costruita per estendersi ad altre fonti.
Cosa sono le vescicole extracellulari (EV/esosomi)?
Le vescicole extracellulari (EV/esosomi) sono particelle su scala nanometrica, delimitate da una membrana, rilasciate naturalmente da praticamente tutti i tipi cellulari nell'ambito della normale comunicazione cellulare. Secondo MISEV2023, il loro diametro varia da circa 30 a 1000 nm, anche se le popolazioni di EV sono intrinsecamente eterogenee e una preparazione di alta qualità si concentra attorno a un picco dimensionale definito, tipicamente 30–200 nm per le EV piccole. Trasportano un carico molecolare complesso, che comprende proteine, lipidi, acidi nucleici (come miRNA e mRNA) e molecole di segnalazione bioattive.
Le EV funzionano come messaggeri intercellulari endogeni: vengono captate dalle cellule riceventi, dove il loro carico può modulare l'espressione genica, influenzare la segnalazione infiammatoria e supportare i meccanismi di riparazione cellulare. Questa attività biologica rende le EV un'area di notevole interesse scientifico e commerciale in tutta la medicina e nel settore consumer health.
Nella biologia cutanea in particolare, le EV di origine botanica sono state studiate nella letteratura peer-reviewed per il loro potenziale ruolo nel supportare l'attività antiossidante e le proprietà condizionanti della pelle in popolazioni di cheratinociti e fibroblasti. I prodotti realizzati con il nostro materiale sono cosmetici e non viene fatta alcuna affermazione di tipo farmacologico o terapeutico.
Nota: il termine "esosoma" è usato colloquialmente nel mercato in generale, ma non è preciso secondo le attuali linee guida ISEV/MISEV2023, che raccomandano "vescicola extracellulare" (EV) come descrittore scientifico principale, a meno che l'origine endosomiale intracellulare non sia confermata sperimentalmente. BioThera usa "EV" come termine scientifico principale in tutti i suoi materiali.
Bistrato fosfolipidico
Membrana lipidica che delimita la EV e ne consente la captazione da parte delle cellule.
Tetraspanine
Marcatori di superficie indicati da MISEV che mediano il riconoscimento e la captazione tra EV e cellula.
Proteine transmembrana
Determinanti dell'incorporazione del carico e del targeting cellulare, inseriti nel bistrato.
Corona biomolecolare
Proteine adsorbite che formano un involucro esterno dinamico, il quale influenza il modo in cui la vescicola interagisce con le cellule.
Carico intraluminale
Proteine, lipidi e acidi nucleici trasportati all'interno della vescicola, comprese le classi bioattive descritte di seguito.
La composizione delle EV e la struttura della corona variano in base al tipo di cellula di origine, al metodo di isolamento e all'ambiente biologico.
Come produce BioThera Solutions le EV di origine vegetale?
BioThera Solutions utilizza un flusso di lavoro di bioproduzione standardizzato e a ciclo chiuso, dall'approvvigionamento a monte e dall'isolamento delle EV fino alla caratterizzazione delle particelle a valle, e produce vescicole extracellulari secondo specifiche allineate a MISEV2023. Il processo è progettato per la riproducibilità da lotto a lotto, la piena tracciabilità e la scalabilità da una produzione di grado di ricerca a una di grado commerciale.
Il nostro processo di isolamento e purificazione delle EV è proprietario e oggetto di una domanda di brevetto. I dettagli del processo non sono divulgati pubblicamente. Ciò che possiamo confermare:
- Progettato fin dall'inizio per la riproducibilità e la scalabilità
- Ogni lotto di produzione è sottoposto a una caratterizzazione analitica standardizzata
- Il materiale della linea clinica viene spedito congelato, con protocolli di catena del freddo mantenuti durante tutta la manipolazione e la distribuzione
- Percorso produttivo orientato verso la conformità GMP e ISO
Il nostro vantaggio competitivo
Sappiamo produrre quantità industriali di EV caratterizzate con il rigore che il settore richiede. Il nostro flusso di lavoro di bioproduzione è l'infrastruttura che mancava al campo delle EV: riproducibile, standardizzato e progettato fin dall'inizio per adattarsi a fonti diverse, a partire dalle EV di origine vegetale, e costruito per supportare applicazioni che vanno ben oltre la prima.
Sistema di controllo qualità
Analisi di tracciamento delle nanoparticelle (NTA)
Concentrazione delle particelle e distribuzione dimensionale misurate per ogni lotto: un metodo fondamentale per la caratterizzazione delle EV secondo MISEV2023.
Certificato di analisi (CoA)
Documentazione a livello di lotto emessa per ogni ciclo di produzione.
Gestione della catena del freddo
Temperatura controllata dalla produzione alla consegna. Il prodotto viene spedito congelato per garantire che la bioattività delle EV sia pienamente preservata all'arrivo.
Caratterizzazione secondo MISEV2023
Caratterizzazione in linea con le linee guida Minimal Information for Studies of Extracellular Vesicles (MISEV2023) pubblicate dall'ISEV.
Stabilità, progettata su misura per ogni linea di prodotto.
Le vescicole extracellulari sono materiale biologico. Temperatura, acqua e tempo giocano tutti a loro sfavore: per questo il modo in cui un prodotto viene conservato e spedito fa parte della sua qualità, non è un aspetto secondario. Progettiamo conservazione e logistica in base alle esigenze di ogni linea di prodotto.
Frozen
Linea clinica: mantenuta congelata
Il materiale della nostra linea clinica viene mantenuto congelato dalla produzione fino alla clinica, con protocolli di catena del freddo rispettati durante tutta la manipolazione e la distribuzione. Ogni spedizione include il Certificato di analisi del lotto contenuto nella confezione.
Lyophilized
Altre linee: liofilizzate per una logistica a temperatura ambiente
Quando una filiera interamente a temperature di congelamento non è praticabile, liofilizziamo le vescicole, cioè le essicchiamo a freddo. La liofilizzazione elimina quasi tutta l'acqua e lascia una forma secca molto più facile da conservare e spedire, e nettamente più stabile a temperatura ambiente rispetto a una preparazione liquida.
Come funziona la liofilizzazione, in parole semplici
01
Congelamento
La preparazione di vescicole viene congelata completamente, intrappolando l'acqua sotto forma di ghiaccio.
02
Rimozione del ghiaccio
Sotto vuoto spinto, il ghiaccio passa direttamente allo stato di vapore senza mai sciogliersi e viene aspirato via. È lo stesso principio utilizzato per molti farmaci iniettabili.
03
Sigillatura a secco
Ciò che resta è un materiale secco, sigillato al riparo dall'umidità fino alla ricostituzione.
Perché funziona
La maggior parte dei processi che degradano nel tempo un prodotto biologico richiede acqua: la degradazione chimica, la crescita microbica e l'aggregazione delle particelle. Eliminando l'acqua, questi processi rallentano drasticamente. La liofilizzazione viene eseguita dal nostro team scientifico in condizioni rigorosamente controllate.
Perché la fonte conta: EV vegetali e di mammifero
Le vescicole extracellulari possono provenire da molte fonti biologiche, e ciascuna si presta ad applicazioni diverse. La nostra piattaforma attuale utilizza vescicole di origine vegetale, che offrono vantaggi concreti in termini di scala e di costi. Man mano che cresciamo, la nostra ricerca si estende a fonti di origine animale, comprese le vescicole derivate da cellule staminali umane, per le applicazioni in cui la loro biologia è più adatta.
Comunicazione biologica tra regni
La capacità delle EV di origine vegetale di interagire con i processi cellulari dei mammiferi e di influenzarli rappresenta un'area emergente e scientificamente importante della ricerca sulle EV. Questa comunicazione biologica tra regni è alla base della nostra prima fonte di EV e orienta il modo in cui valutiamo ogni applicazione che sviluppiamo sulla piattaforma.
Origine vegetale: pensata per la scala
Una biomassa abbondante e rinnovabile e l'assenza di colture cellulari rendono la produzione più semplice e meno costosa, senza bisogno di materiale da donatori animali o umani.
Origine vegetale: un punto di partenza pulito
Le fonti vegetali riducono i rischi di contaminazione e di variabilità tra donatori tipici delle colture di cellule di mammifero, e il lungo impiego di attivi botanici in cosmetica fornisce un profilo di sicurezza di riferimento ben caratterizzato per l'uso topico.
Origine mammifera: una biologia rilevante per l'uomo
Le vescicole da cellule di mammifero, comprese le cellule staminali umane, trasportano molecole di segnalazione modellate dalla biologia dei tessuti umani e sono la fonte più studiata nella ricerca terapeutica.
Scegliere in base all'applicazione
Nessuna fonte è la migliore per ogni uso. Abbiniamo la fonte all'applicazione, e la nostra competenza in produzione e caratterizzazione si applica a tutte le fonti.
Quale carico bioattivo trasportano le EV di origine vegetale?
La caratterizzazione proteomica dell'attuale materiale EV di origine vegetale di BioThera ha identificato proteine distribuite in tre classi funzionali: associate all'attività antiossidante, all'attività antinfiammatoria e alla cicatrizzazione/rigenerazione. Queste classi di carico sono coerenti con il profilo biologico ben documentato di Aloe barbadensis in decenni di letteratura peer-reviewed.
BioThera ha identificato tre classi distinte di carico bioattivo nelle nostre EV derivate da piante, confermato dall'analisi proteomica.
Carico antiossidante
Molecole ad attività antiossidante, tra cui composti fenolici di origine vegetale e scavenger dei radicali liberi, confermate dalla proteomica. Attenuano lo stress ossidativo nelle popolazioni di cellule cutanee e supportano i meccanismi di difesa cellulare.
Frazione bioattiva lenitiva per la pelle
Molecole di segnalazione confermate dalla proteomica: composti studiati nella ricerca su colture cellulari per la loro associazione con proprietà lenitive e calmanti nelle popolazioni di cheratinociti e fibroblasti.
Frazione bioattiva di rinnovamento cutaneo
Molecole associate ai fattori di crescita e specie di miRNA confermate dalla proteomica: composti studiati nella ricerca su colture cellulari per il loro ruolo nel supportare il rinnovamento delle cellule cutanee e i processi di condizionamento.
Caratterizzazione del carico bioattivo condotta mediante proteomica e in linea con le linee guida MISEV2023. Non viene fatta alcuna affermazione terapeutica. I prodotti realizzati con il nostro materiale sono cosmetici ai sensi del Regolamento canadese sui cosmetici (Cosmetic Regulations, C.R.C., c. 869).
Una piattaforma. Molte applicazioni.
Lo stesso flusso di isolamento e caratterizzazione alimenta ogni applicazione sviluppata sulla piattaforma. Scopri cosa fornisce, quali aree applicative serve e fin dove è effettivamente arrivata ciascuna.
Scopri le applicazioniCome interagiscono le EV di origine vegetale con la pelle umana?
Le attuali evidenze scientifiche supportano l'interazione delle EV con la superficie e l'epidermide come meccanismo principale attraverso cui le EV di origine vegetale applicate per via topica possono influenzare la biologia cutanea. BioThera Solutions presenta un modello stratificato per livello di evidenza, che distingue le interazioni superficiali ben supportate dalle vie follicolari plausibili, pur sottolineando che sono necessarie ulteriori ricerche per dimostrare la penetrazione passiva di particelle intatte delle dimensioni delle EV (30–1000 nm) attraverso lo strato corneo.
Si propone che le vescicole extracellulari interagiscano con la pelle umana attraverso molteplici vie, ciascuna con un distinto livello di supporto sperimentale. Questo modello distingue le interazioni superficiali ed epidermiche ben documentate dalla penetrazione follicolare plausibile. La diffusione passiva trans-strato corneo di particelle EV intatte (30–1000 nm) rimane un'area in cui sono necessarie ulteriori ricerche per dimostrare la penetrazione attraverso lo SC. Nessun meccanismo rappresentato è clinicamente confermato.
Livelli di evidenza delle vie
Modello delle vie stratificato per livello di evidenza: nessun meccanismo è clinicamente confermato. Questa illustrazione mappa le vie di interazione proposte in base a diversi livelli di supporto sperimentale. L'interazione superficiale ed epidermica (superficie dello strato corneo, cheratinociti) è ben supportata dalla letteratura sulle EV botaniche. La penetrazione follicolare attraverso il canale del follicolo pilifero e il dotto sebaceo è una via plausibile e sempre più studiata per le particelle su scala nanometrica. La diffusione passiva trans-strato corneo di particelle intatte delle dimensioni delle EV (30–1000 nm) resta un'area di indagine attiva; sono necessarie ulteriori ricerche per dimostrare la penetrazione passiva attraverso lo SC.
Accuratezza anatomica e inquadramento del sito d'effetto. Le proporzioni degli strati sono calibrate su standard di riferimento istologici in colorazione H&E. L'epidermide è rappresentata a una scala 3× rispetto a quella relativa reale. La vascolarizzazione è mostrata in vista longitudinale; follicolo pilifero, ghiandola sebacea, ghiandola sudoripara eccrina e innervazione dermica sono posizionati in modo anatomicamente corretto. L'opacità delle EV si attenua con la profondità per riflettere la minore certezza sulla penetrazione. Il derma è indicato come sito proposto dell'effetto biologico: le interazioni superficiali possono avviare cascate di segnalazione che si propagano alle popolazioni cellulari dermiche più profonde, indipendentemente dal fatto che le EV attraversino fisicamente lo strato corneo.